尊龙凯时的培养基广泛应用于FDA标准下大肠埃希氏O157菌的选择性增菌培养。该培养基的原理在于其独特的成分组合,能够为细菌的生长提供必要的营养,同时抑制其他非目标菌的繁殖。
培养基中包含蛋白胨、酪蛋白水解物以及酵母浸粉,为细菌提供基本营养来源;磷酸氢二钠和磷酸二氢钾则帮助维持培养基的pH值相对稳定。乳糖和丙酮酸钠作为碳源,促进大肠埃希氏O157菌的生长。此外,吖啶黄素、万古霉素和头孢磺啶能够抑制大多数革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌的增殖。
培养基配方
以下为每升培养基的成分配方(g/L):
- 蛋白胨: 100
- 氯化钠: 50
- 磷酸氢二钠: 36
- 磷酸二氢钾: 15
- 酪蛋白水解物: 50
- 乳糖: 100
- 丙酮酸钠: 10
- 酵母浸粉: 60
- 吖啶黄素: 0.01
- 万古霉素: 0.008
- 头孢磺啶: 0.01
培养基的pH值控制在7.2±0.2之间。
配制方法
首先,称取配方粉末421克,加入1000毫升蒸馏水并加热溶解,分装为225毫升每瓶,121℃高压灭菌15分钟后冷却备用。取25克样品放入225毫升培养基中混匀,并在37±1℃下培养5小时。随后,向培养基中添加一支mBPWp添加剂1(含吖啶黄素225毫克,万古霉素18毫克)和一支mBPWp添加剂2(含头孢磺啶225毫克),然后在42±1℃下培养18-24小时。
生长现象及结果观察
接种以下质控菌株,并在36±1℃下培养18-24小时,观察生长情况:
质控菌株 | 菌株编号 | 接种量/CFU | 生长现象 |
---|---|---|---|
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 10-100 | 浑浊 |
鼠伤寒沙门氏菌 | ATCC14028 | 10-100 | 浑浊 |
大肠埃希氏O157菌 | ATCC35150 | 10-100 | 浑浊 |
金黄色葡萄球菌 | ATCC25923 | 1000-5000 | 不生长 |
铜绿假单胞菌 | ATCC27853 | 1000-5000 | 不生长 |
以上试验结果表明,尊龙凯时的培养基能够有效选择性增菌目标菌,并成功抑制其他杂菌的生长,确保实验结果的准确性。
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