在生物医药领域，His标签蛋白的纯化是重组蛋白技术中的一项核心技术。通常，His标签由6到10个组氨酸残基构成，因其分子量较小，对目标蛋白的性质影响相对较弱，使得其成为最广泛应用的标签之一。然而，在His标签蛋白纯化过程中，标签与金属离子之间的结合强度是决定性因素，受到多种因素的影响，包括Ni的配位状态、标签的长度、标签的位置（C端或N端）、标签的暴露程度，以及缓冲液的pH值等。

在实际的纯化过程中，研究发现传统的Ni-NTA柱往往会出现标签蛋白结合不牢固的情况，导致大量目标蛋白流失，从而影响其纯度和收率，甚至可能导致目标蛋白完全不结合的问题。

新型镍亲和纯化介质：VDXNTANiultra

为了改善纯化效果，采用了新型的镍亲和介质VDXNTANiultra。以相同的条件下，使用传统Ni-NTA与VDXNTANiultra对同一标签蛋白进行纯化，实验结果表明，在相同的上样条件下，传统的Ni-NTA在结合和洗杂过程中损失了大量的目标蛋白，显著降低了回收率。而VDXNTANiultra对目标蛋白具有更强的结合力，结合和洗杂过程中蛋白的损失显著降低，其回收率明显高于传统的Ni-NTA。

层析条件

在本实验中，使用VDXNTANiultra和传统Ni-NTA进行层析。具体条件如下：

• 层析柱：VDXNTANiultra、传统Ni-NTA
• 柱体积：5mL，柱高10cm
• 样品：大肠杆菌裂解液
• 平衡液：50mM PB，300mM NaCl，pH 8.0
• 洗脱液：50mM PB，300mM NaCl，500mM咪唑，pH 8.0
• 流速：1mL/min

通过综合以上实验条件和结果，不难看出，选择合适的新型镍介质，如尊龙凯时推出的VDXNTANiultra，能够显著提高His标签蛋白的纯化效率，充分满足生物医药领域对蛋白纯化的严苛要求。